簡(jiǎn)要描述:
超氧陰離子清除能力測(cè)試盒作為生物體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機(jī)體衰老和病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。
更新時(shí)間:2024-09-03;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:930
商品詳情:
超氧陰離子清除能力測(cè)試盒測(cè)定意義:
超氧陰離子自由基作為生物體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機(jī)體衰老和病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3273 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3273-1 | 50管/48樣 | 可見(jiàn)分光光度法 |
測(cè)定原理:
AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-與對(duì)氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對(duì)超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負(fù)相關(guān)。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
樣品中AA提取:
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3.血清等液體:直接檢測(cè)。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
膠原蛋白ⅡELISA試劑盒 HCBⅡ免費(fèi)代測(cè)試劑
降脂素ELISA試劑盒 Adipsin免費(fèi)代測(cè)試劑
降解加速因子ELISA試劑盒 DAF免費(fèi)代測(cè)試劑
堿性胎兒蛋白ELISA試劑盒 BFP免費(fèi)代測(cè)試劑
堿性拉鏈轉(zhuǎn)錄因子ATF樣蛋白ELISA試劑盒 BATF免費(fèi)代測(cè)試劑
間變性淋巴瘤激酶ELISA試劑盒 ALK免費(fèi)代測(cè)試劑
間α-胰抑制因子重鏈H1ELISA試劑盒 ITIH1免費(fèi)代測(cè)試劑
間-alpha-胰抑制劑重鏈H4ELISA試劑盒 ITIH4/IHRP/ITIHL1/PK120/PRO1851免費(fèi)代測(cè)試劑
甲狀腺抗體ELISA試劑盒 TAb免費(fèi)代測(cè)試劑
甲狀腺激素受體βELISA試劑盒 THRb免費(fèi)代測(cè)試劑
甲狀腺非肽激素抗體ELISA試劑盒 THAA免費(fèi)代測(cè)試劑
甲狀腺刺激免疫球蛋白ELISA試劑盒 TSI免費(fèi)代測(cè)試劑
甲狀旁腺激素樣蛋白ELISA試劑盒 PLP免費(fèi)代測(cè)試劑
甲狀旁腺激素1受體ELISA試劑盒 PTH1R免費(fèi)代測(cè)試劑
甲狀旁腺激素1-34ELISA試劑盒 PTH 1-34免費(fèi)代測(cè)試劑
超氧陰離子清除能力測(cè)試盒土壤β葡萄糖苷酶(Sβ GC)/纖維二糖酶測(cè)試盒100管/48樣 微量法
土壤β葡萄糖苷酶(Sβ GC)/纖維二糖酶測(cè)試盒50管/24樣 可見(jiàn)分光光度法
土壤β葡萄糖苷酶(Sβ GC)/纖維二糖酶測(cè)試盒100管/96樣熒光法
土壤纖維素酶(SCL)/羧甲基纖維素酶測(cè)試盒100管/48樣 微量法
土壤纖維素酶(SCL)/羧甲基纖維素酶測(cè)試盒50管/24樣 可見(jiàn)分光光度法
土壤纖維素酶(SCL)/羧甲基纖維素酶測(cè)試盒100管/96樣熒光法
土壤過(guò)氧化氫酶(SCAT)測(cè)試盒100管/48樣 微量法
土壤過(guò)氧化氫酶(SCAT)測(cè)試盒50管/24樣 紫外分光光度法
土壤硝還原酶(SNR)測(cè)試盒100管/48樣 微量法