簡(jiǎn)要描述:
ATP含量測(cè)試盒廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測(cè)定ATP含量并且計(jì)算能荷,能夠反映能量代謝狀態(tài)。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1108
商品詳情:
ATP含量測(cè)試盒測(cè)定意義:ATP廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測(cè)定ATP含量并且計(jì)算能荷,能夠反映能量代謝狀態(tài)。
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3218 | 100管/48樣 | 微量法 |
測(cè)定原理:肌酸激酶催化肌酸和ATP反應(yīng)生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測(cè)磷酸肌酸含量,以此反應(yīng)ATP含量。自備儀器和用品:分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。
樣品中AA提取:
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3.血清等液體:直接檢測(cè)。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
連環(huán)蛋白α2ELISA試劑盒 CTNNα2免費(fèi)代測(cè)試劑
連環(huán)蛋白α1ELISA試劑盒 CTNNα1免費(fèi)代測(cè)試劑
粒細(xì)胞特異性抗核抗體ELISA試劑盒 GSANA免費(fèi)代測(cè)試劑
粒細(xì)胞集落刺激因子受體ELISA試劑盒 GCSFR免費(fèi)代測(cè)試劑
粒鈣蛋白ELISA試劑盒 GCA免費(fèi)代測(cè)試劑
犁鼻1受體5ELISA試劑盒 VN1R5免費(fèi)代測(cè)試劑
犁鼻1受體4ELISA試劑盒 VN1R4免費(fèi)代測(cè)試劑
犁鼻1受體3ELISA試劑盒 VN1R3免費(fèi)代測(cè)試劑
犁鼻1受體2ELISA試劑盒 VN1R2免費(fèi)代測(cè)試劑
犁鼻1受體1ELISA試劑盒 VN1R1免費(fèi)代測(cè)試劑
類脂肪酶AELISA試劑盒 LPHA免費(fèi)代測(cè)試劑
類胰δ1ELISA試劑盒 TPSδ1免費(fèi)代測(cè)試劑
類胰γ1ELISA試劑盒 TPSγ1免費(fèi)代測(cè)試劑
類胰β2ELISA試劑盒 TPSβ2免費(fèi)代測(cè)試劑
類固醇生成因子1ELISA試劑盒 SF1免費(fèi)代測(cè)試劑
ATP含量測(cè)試盒高鐵還原酶(FCR)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣
高鐵還原酶(FCR)測(cè)試盒/微量法100管/96樣
高鐵血紅蛋白(MetHb)測(cè)試盒/比色法100管/96樣
高鐵血紅蛋白(MetHb)測(cè)試盒/比色法50管/48樣
共價(jià)結(jié)合型果膠(CSP)含量測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣
共價(jià)結(jié)合型果膠(CSP)含量測(cè)試盒/微量法100管/48樣
(Glu)含量測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣
(Glu)含量測(cè)試盒/微量法100管/96樣
測(cè)試盒/比色法50管/48樣