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ELISA試劑盒SCI文章方法分析
更新時間:2017-09-01   點擊次數:800次

ELISA試劑盒SCI文章是酶聯接免疫吸附劑測定的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。 
(一) 原理 
ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。
(二) 操作步驟 
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法: 
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。。 
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。 
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。 
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。 
6. Sulfisoxazole Acetyl    YSRIBIO171    80-74-0     200mg    磺胺乙酰異噁標準品
    YSRIBIO1709    22884-10-2     30mg    唑來瞵酸相關物質A標準品
(+)-Catechin    YSRIBIO1708    154-23-4    25mg    (+)-兒茶酸標準品
(E)-Thiothixene    YSRIBIO1707    3313-27-7     100mg    (E)-替沃噻噸標準品
1,4-Benzoquinone    YSRIBIO1706    106-51-4    200mg    1,4-苯醌標準品
1,4-Sorbitan     YSRIBIO1705    27299-12-3     300mg    1,4-脫水山梨糖醇標準品
1,6-anhydro-D-glucose    YSRIBIO1704    498-07-7    50mg    1,6-脫水吡喃葡萄糖標準品
10-Formylfolic Acid     YSRIBIO1703    134-05-4     25mg    10-甲酰葉酸標準品
12-Hydroxystearic Acid    YSRIBIO1702    106-14-9     200mg    12-羥基硬脂酸標準品
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