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用ELISA法挑選ELISA測試盒
更新時間:2016-10-14   點擊次數:861次

用ELISA法挑選ELISA測試盒

怎樣靈活應用ELISA這個檢測方法以及怎樣去挑選ELISA測試盒。ELISA這個方法的原理,大家都很明白,網上的資料很多。可真正用起來的時候,偶然間就會有點犯糊涂,我談一下自己的理解。

1、ELISA檢測方法簡單,靈敏度高,我個人認為ELISA檢測血清或者培養上清的細胞因子、胰島素、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測;病原體抗原的定性與定量;評估自己制備的血清抗體的效價等。很多客戶有個誤區,拿來一個指標就想當然地嘗試用ELISA去檢測,我還是建議多動腦,該檢測活性的檢測活性,該做western的做western。
2、對付一些小分子的檢測,例如:前線腺素、糖皮質激素的檢測,我的理解是要用競爭法ELISA去檢測,也要購買采用這個方法的盒試劑盒。ELISA試劑盒一般細胞因子的檢測,都是采用常規的夾心法ELISA檢測,由于因子分子量比力大,一般10幾個KD左右,很容易找到兩個或多個抗原表位。
而小分子很難找到兩個不通的表位,也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結合小分子并固相化。解決方案便是酶標板上包被二抗,每個孔加入一定量的酶標的小分子,然后加樣品,再加不帶標志的檢測抗體,顯色底物。樣品的目標小分子的含量越高,吸光度越低。
 
3、有些客戶會用OVA(卵清卵白)做一些哮喘,過敏性腸炎的模型,然后會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清內里IgG,IgE等指標。
4、NO的檢測,一般都是采用經典的Greiss法,如今市場上竟然有NO ELISA試劑盒,真是徹夜未眠也搞不明白。另外還有做氧化應激指標MDA的檢測,我推薦ELISA測試盒。
 

 

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